河北来复医药科技有限公司
联系电话：0311-68058422、88662277
地 址：石家庄市高新区长江街道天山大街51号久福大厦8楼818
(1) 样品处理
1.1 提取用试剂
提取液：含20% 0.1 mol/L氢氧化钾溶液60%甲醇水溶液；
淋洗液：含30% 0.1mol/L氢氧化钾溶液，50％乙腈水溶液；
洗脱液：甲醇：乙腈：甲酸：蒸馏水=4：5：0.5：0.5
1. 2 提取
a) 玉米：将样品粉碎，称取玉米粉10g，加入50mL氯仿，震荡3～5分钟，用滤纸过滤，取滤液10mL进入一个100mL平底烧瓶中，于60℃水浴中旋转蒸发至近干，用20mL石油醚溶解残渣，加入10mL提取液，震荡3～5分钟，分层后，用滤纸过滤，取下层提取液5mL进行固相萃取。
b) 糙米、小麦、小麦粉和大豆：将样品粉碎，称取粉碎样品l0g，加入50mL提取液，震荡3～5分钟，用滤纸过滤，取滤液10mL进入一个100mL平底烧瓶中，加入20mL石油醚，震荡3～5分钟，分层后，用滤纸过滤，取下层提取液5mL至Qdaura 卓睿全自动固相萃取仪上样管中进行固相萃取操作。
(2) 固相萃取净化
Cleanert PAX固相萃取柱置于Qdaura卓睿全自动固相萃取仪中，上样管至于对应位置，设定操作程序如下：5mL甲醇，3mL提取液活化，加样5mL，10mL淋洗液淋洗，吹干，最后用5mL洗脱液洗脱OA，收集(以上操作流速均为1mL/min)。收集液于60℃水浴中旋转蒸发至干，用1mL流动相溶解残留物，经滤器过滤后上液相色谱检测。
(3) 色谱条件
色谱柱：Venusil ASB C18柱 (4.6 mm×250mm, 5μm)
保护柱：Venusil ASB C18柱 (4.6mm×10mm, 5μm)
流动相：乙腈：水：乙酸=48：51：1；
检测器波长：激发光333 nm，发射光460 nm；
进样量：25μL；流速：1mL/min；柱温：30℃
(4) 结果
以小麦粉、小麦、玉米、糙米和大豆为研究对象，分别作三个不同浓度OA添加水平，这三个浓度分别为0.8μg/kg、4μg/kg、10μg/kg，每个浓度水平作6次平行性检测。检测回收率和精密度数据见表l、表2和表3；典型色谱图见图3。
表1 添加OA浓度为0.8μg/kg时各种粮食回收率和精密度:
|
粮食 |
各个平行试验回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
|
小麦粉 |
101.8 |
107 |
101.4 |
89.1 |
107.6 |
93.4 |
104.1 |
4.93 |
|
小麦 |
98.2 |
94.6 |
90.2 |
102.5 |
89.9 |
93.4 |
94.8 |
5.13 |
|
玉米 |
1130.3 |
112.2 |
100.5 |
98.5 |
101.9 |
105.7 |
104.8 |
5.13 |
|
糙米 |
86.7 |
89 |
90.9 |
85.7 |
90 |
86.7 |
88.2 |
2.36 |
|
大豆 |
101.2 |
100.9 |
92.9 |
92.2 |
99.4 |
98.4 |
97.5 |
4.07 |
表2 添加OA浓度为4μg/kg时各种粮食回收率和精密度:
|
粮食 |
各个平行试验回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
|
小麦粉 |
96.8 |
92.8 |
83.7 |
85.5 |
89.8 |
92.6 |
90.2 |
5.34 |
|
小麦 |
101 |
99.3 |
98.8 |
106.2 |
100.2 |
98.6 |
100.7 |
2.78 |
|
玉米 |
91.5 |
92.7 |
90.8 |
86.8 |
87.7 |
91.3 |
90.1 |
2.6 |
|
糙米 |
90.3 |
85.7 |
94.1 |
96.3 |
96.1 |
95.8 |
93 |
4.56 |
|
大豆 |
89.5 |
93.8 |
93.7 |
89.4 |
89.1 |
88.9 |
90.7 |
2.61 |
表3 添加OA 浓度为10μg/kg 时各种粮食回收率和精密度:
|
粮食 |
各个平行试验回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%) |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
|||
|
小麦粉 |
98 |
95.8 |
92.2 |
78.2 |
95.6 |
89.8 |
91.6 |
7.85 |
|
小麦 |
85.9 |
91.7 |
90.1 |
86 |
90.5 |
88.9 |
88.8 |
2.71 |
|
玉米 |
91.5 |
93.3 |
83.3 |
82.1 |
88.1 |
90.6 |
88.1 |
5.22 |
|
糙米 |
96.2 |
87.9 |
92.6 |
91.1 |
95.4 |
94.7 |
93 |
3.35 |
|
大豆 |
99 |
95.3 |
102.8 |
97.2 |
98.4 |
91 |
97.3 |
4.05 |
表3 小麦中OA 检测典型色谱图:
|
产品名称 |
规格包装 |
订货号 |
|
Qdaura卓睿全自动固相萃取仪 |
4通道24位 |
SPE-40 |
|
LC-10F高效液相色谱仪 |
10ml/min, 梯度系统,200-800nm双波长检测器 |
FL-LC010GS |
|
CC-100分析型色谱柱温箱 |
温控范围：5-70℃;可安装1-2支300mm色谱柱 |
CC-100 |
|
Cleanert PAX固相萃取柱 |
200mg/6mL, 30/pk |
AX2006 |
|
Venusil ASB C18液相色谱柱 |
4.6 mm ×250 mm, 5μm |
VS952505-0 |
|
Venusil ASB C18保护柱 |
4.6mm×10mm, 5μm |
VS950105-0 |
|
针式过滤器(Nylon) |
0.22μm, 直径13mm,200/pk |
AS021320 |
|
一次性无针头注射器 |
5mL, 100/pk |
ZSQ-5ML |
|
1.5mL样品瓶 |
短螺纹透明带书写32×11.6mm,100/pk |
1109-0519 |
|
1.5mL样品瓶盖 |
9mm中心孔蓝盖，红色橡胶/米色PTFE隔垫,45．Shore A1.0mm,100/pk |
0915-1819 |
|
甲醇 |
4×4L/箱 |
AH230-4 |
|
乙腈 |
4×4L/箱 |
AH015-4 |
应用编号：CU1010
上一篇： 真菌毒素
版权所有© 河北来复医药科技有限公司
技术支持：七星网路
