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1.执行标准
《GB 5413.37—2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定》
2.样品前处理
牛乳样品：
• 称取 50 mL 牛乳样品，加热到 35℃~37℃；
• 于 10000r/min 离心 15 min；
• 去除乳脂及沉淀，取上层全部溶液用于上样检测。稀释倍数：0.02固体奶粉及制品：
• 10 g 固体样品，用 50 mL 50℃ 热蒸馏水溶解混匀；
• 冷却至 20℃，并定容至 100 mL；
• 于 10000 r/min 离心15 min；
• 去除乳脂及沉淀；
• 取上层溶液10 mL，用蒸馏水定容至50 mL；
• 取定容后的液体，全部用于上样检测。稀释倍数：1
3.操作步骤
• 取出免疫亲和柱，将上方塞子取出斜剪断，再插回亲和柱上；(3 mL 的免疫亲和柱去掉上方塞子，安装上转接头，将转接头另一端与针筒固定后使用)
• 将柱子与气控操作架上的针筒连接固定，处理后的溶液上样；
• 去掉亲和柱下方堵头，调节开关，使液体以 1~2d/s 的速度流出；
• 待液体排干后，更换新针筒，用 10 mL 蒸馏水洗涤 1次，流速 2~3d/s；
• 待液体排干后，更换新针筒，上样 1 mL 甲醇，用样品瓶接洗脱液，流速 1d/s；
• 洗脱后液体可用于检测。
4. 注意事项
• 使用前，免疫亲和柱需回至室温 (22~25℃)。
• 每次上样前都要将上次液体完全排干。
• 也适用于 GB 5413.37-2010。
5.色谱条件
色谱柱：Venusil® XBP C18(L)；150 mm×2.1 mm，5 μm；
流动相：A 液，0.1% 甲酸溶液；
B 液，乙腈:甲醇溶液 (1:1)；
流 速：1.0 mL/min； 柱 温：35℃；
试液温度：20℃； 进样量：10 μL；
梯度洗脱：
|
时间(min) |
流动相A% |
流动相B% |
梯度变化曲线 |
|
0 |
68 |
32 |
- |
|
4.2 0 |
55 |
45 |
6 |
|
5.0 0 |
0 |
100 |
6 |
|
5.7 0 |
0 |
100 |
1 |
|
6.0 0 |
68 |
32 |
6 |
注：1为即时变化,6为线性变化。
检测方式：多离子反应监测(MRM)，详见表1中母离子、子离子和碰撞能量。
离子源控制条件：
|
电离方式 |
电喷雾电离，负离子 |
|
毛细管电压(kV) |
3.5 |
|
锥孔电压(V) |
45 |
|
射频透镜1电压(V) |
12.5 |
|
射频透镜2电压(V) |
12.5 |
|
离子源温度(℃) |
120 |
|
锥孔反吹气流量(L/h) |
50 |
|
脱溶剂气温度(℃) |
350 |
|
脱溶剂气流量(L/h) |
500 |
|
电子倍增电压(V) |
650 |
6.订货指南
|
产品名称 |
规格包装 |
订货号 |
|
Venusil® XBP C18(L) |
2.1×250 mm, 5 μm, 100 Å |
VX951502-L |
|
黄曲霉毒素 M1免疫亲和柱 |
3 mL |
BAC09003-1 |
7. 质控指标
项目：黄曲霉毒素M1
标准：GB5413.37—2010
限量：0.5 μg/kg
|
表1 离子选择参数表 |
||||||
|
黄曲霉毒素 |
母离子 |
定量子离子 |
碰撞能量 |
定性子离子 |
碰撞能量 |
离子化方式 |
|
M1 |
329 |
273.5 |
22 |
259.5 |
22 |
ESI+ |
应用编号：AF10018
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